水中苯甲酸钠标准物质的研制（一）

近年来食品安全事故频发，食品安全问题愈发 突出，其中食品添加剂的使用备受关注［1］。防腐剂 作为食品添加剂的重要组成部分，在食品生产加工 过程中添加适量防腐剂可有效防止由微生物引起 的食品腐变质，延长食品保质期或保证食品安全 等［2–5］。苯甲酸钠在空气中比较稳定且成本较低，应 用极为广泛［6–7］。苯甲酸钠作为食品添加剂，必须 严格按照 GB 2760–2014《食品安全国家标准 食 品添加剂使用标准》的规定*添加，严禁超标使 用［8］。苯甲酸钠在酸性条件下溶解度较低，生产过 程中搅拌不均匀会导致食品局部苯甲酸钠超标，食 用后直接影响人体健康甚至危及生命［9–10］。因此苯 甲酸钠应在严格受控的情况下使用，添加含量也应 准确测量。 目前测定苯甲酸钠的方法为液相色谱 – 紫外可 见分光光谱法。GB 2760–2014 标准中允许使用苯 甲酸作为标准物质对苯甲酸钠进行定量分析，同一 物质的量浓度的苯甲酸和苯甲酸钠在液相色谱 – 紫 外可见分光光谱法下的谱图基本重合，苯甲酸及苯 甲酸钠具有一致的表征结果，可相互替代使用。但 基于其它原理的检测方法，此两种物质不能通用。 随着待测食品种类扩大和食品基质成分复杂化，食 品中非待测成分干扰日益增多，对样品纯化和检测 方法要求越来越高［11］。发展低成本，高灵敏度，操 作简单，分析时间短，环境友好型测定方法将是今后 研究的方向［12］。目前国内外只有苯甲酸纯度标准 物质，尚无苯甲酸钠有证纯度标准物质或溶液标准 物质［13］。笔者研制的水中苯甲酸钠标准物质的标 准值为 (23.6±0.3) mg／L，有效期为 6 个月，达到国 家二级标准物质要求。该标准物质具备良好的均匀性和稳定性，可用于食品检验、卫生检疫等部门对食 品防腐剂苯甲酸分析方法的确认与评价、仪器校准 与检测质量控制［14–15］。

1 实验部分 

1.1 主要仪器与试剂

高效液相色谱仪：（1）HPLC–1260 型，配有紫外 检测器，安捷伦科技（中国）有限公司，（2）LC–20A 型，配有二极管阵列检测器，日本岛津贸易有限 公司；质谱仪：LTQ FT Ultra 型，增强线性离子阱回旋 组合，配备 Finnigan Xcalibur 数据处理系统，美国赛 默飞世尔科技公司； 原子吸收光谱仪：Pin AAcle 900T 型，美国珀金 埃尔默公司； 紫外可见分光光度计：TU–1810 PC 型，北京普 析通用仪器有限责任公司； 电子天平：BT125D 型，感量为 0.000 01 g，德国 赛多利斯集团有限公司； 纯水制备器：UPR–II–10T 型，四川优普超纯科 技有限公司； 醋酸铵：分析纯，北京化学工业集团有限责任 公司；甲醇：色谱纯，美国飞世尔科学世界公司； 苯甲酸钠：纯度标示值为 (99.4±1.0)%，德国 Dr.Ehrenstorfer 公司； 实验用水为超纯水。

1.2 仪器工作条件 

1.2.1 液相色谱

色谱柱：C18 柱 (250 mm×4.6 mm，5 μm，美国 安捷伦科技有限公司 ) ；柱温：室温；流动相：甲醇 +0.02 mol／L 乙酸铵水溶液 ( 体积比为 6∶94)，流量： 1.0 mL／min ；进样体积：20 μL ；检测器：二极管 阵列检测器；波长：230 nm。 

1.2.2 质谱

ESI 源：负离子检测；扫描范围：100～600 amu ； 鞘气流量：1.5 mL／min ；辅助气流量：0.6 mL／min， 源电压：3.50 kV ；毛细管温度：275℃；毛细管电压： 35 V ；透镜电压：115 V。

1.3 苯甲酸钠纯度验证 

1.3.1 定性分析

采用高分辨质谱法、核磁共振法 ( 氢谱、碳谱 )、 紫外吸收光谱法、红外吸收光谱法进行定性分析。 1.3.2 定量分析 采用原子吸收光谱法排除钾盐污染，测定试样 中钠盐的纯度。

1.4 水中苯甲酸钠标准物质的制备

以苯甲酸钠、纯水为原料，于 (20±5)℃室温条 件下采用重量 – 容量法配制。取原料物质于 105℃ 高温烘箱中恒温干燥，分别称取 0.023 61，0.023 62， 0.023 63 g 经验证的苯甲酸钠纯品于烧杯中，用少量 水溶解，分别转移至 1 L 容量瓶中，烧杯用适量水洗 涤后一并转入容量瓶，定容至标线，再转移至储液瓶 中，混匀，在洁净的环境中，采用 RFJ 安瓿瓶熔封机 将制备好的溶液分装至 500 只 5 mL 的洁净安瓿瓶 中，编号，避光保存。

1.5 均匀性检验 

在随机数表中任意第 31 行和第 10 列交 叉数为起点，往右连续取 3 个数，得到所需抽样编 号，大于 500 的数舍去，直至获得 15 个随机数依次 为 225#，196#，214#，364#，042#，390#，430#，380#，415#， 145#，300#，221#，356#，346#，070#，取出相应编号的安 瓿瓶，每瓶样品分装至 2 个进样小瓶中，分别采用紫 外检测器进行平行测定。

1.6 稳定性检验

1.6.1 长期稳定性

在室温恒温、干燥及避光的保存条件下对标准 物质进行 6 个月的连续测定。随机抽取 3 瓶样品， 每瓶样品测定 2 次，样品配制当天开始，每间隔 1 个 月考察 1 次。

1.6.2 短期稳定性

模拟标准物质运输和传递过程，随机抽取 3 瓶 样品于 35～40℃环境中，时间跨度为 7 天，每瓶样品 平行测定 2 次。